Kvalitativní analýza hepatitidy C

Zanechat komentář 9 080

Kvalitativní analýza polymerázové řetězové reakce - PCR pro hepatitidu C určuje přítomnost nebo nepřítomnost HCV v těle. V laboratorních podmínkách se studuje struktura RNA, která zahrnuje virus. V případě zjištění viru C je nutné podstoupit léčbu, jelikož zanedbaný stav jater způsobí vážné následky. Vysoce kvalitní PCR se provádí i po zotavení, aby se potvrdila nepřítomnost protilátek. Přiřazeno pro rutinní kontrolu. Při nízké koncentraci příčinného činidla v krvi nemůže PCR (kvalitativní) detekovat nic, protože diagnostický systém má své vlastní prahy citlivosti. V případě počátečního stadia onemocnění nebo mírné formy se ultra-diagnostika PCR provádí na ultra-citlivém zařízení.

Co je RNA virus?

Termín RNA viru hepatitidy C (nebo RNA viru hepatitidy C) je samotné onemocnění jater. Virus C se váže na zdravou buňku těla pronikáním dovnitř. Časem, rozšiřující se po celém těle, je nutné pouze dostat se do krve. Výsledkem je, že patogen proniká játry, spojí se s buňkami a tvrdě pracuje. Hepatální buňky (hepatocyty) pracují pod jeho vlivem, procházejí změnami a z tohoto oni umírají. Čím delší je virus C v játrech, tím větší počet buněk zemře. Postupně se vyvíjejí nebezpečné nemoci, které vedou ke zhoubné degeneraci a smrti.

Infekce jater s tímto typem viru se nemusí projevovat zvnějšku. Po mnoho let nebo desetiletí se nakažená osoba cítí naprosto zdravá a pouze náhodná vyšetření nejčastěji odhaluje patologii. Při darování krve za hepatitidu se zkoumá část řetězce RNA (ribonukleové kyseliny), která je součástí lidského genu (DNA). Výsledky laboratorních testů by neměly být použity pro vlastní léčbu, protože to je pouze indikátor. Přesný obraz a další diagnózu je lépe určen lékařem.

Po provedení: indikace pro výzkum

Při potvrzení HCV se provede PCR analýza (polymerázová řetězová reakce). Studie PCR pomáhají najít patogenní materiál ve struktuře RNA a předepisují účinnou terapii. Jsou jmenováni v následujících případech:

  • detekce příznaků zánětu jater;
  • screeningové studie prevence;
  • vyšetření osob v kontaktu;
  • diagnostika hepatitidy smíšeného původu (stanovení hlavního patogenu);
  • stanovení úrovně reprodukční aktivity viru v chronické formě;
  • cirhóza jater;
  • k určení účinnosti předepsané léčby.
Studie PCR jsou předepsány lékařem k určení účinnosti léčby hepatitidy.

Existuje kvalitativní i kvantitativní analýza PCR. Kvantitativní PCR ukazuje procentní poměr RNA k virovým nosičům v krvi a kvalitativní indikuje přítomnost nebo nepřítomnost viru. Pozitivní ukazatel kvality (přítomnost hepatitidy C RNA) také vyžaduje kvantitativní výzkum. Vysoká koncentrace kauzálního agens hepatitidy C je spojena s rizikem přenosu, tj. Infekcí druhých. Nízké počty jsou lépe léčebné. Množství RNA virů v krvi nesouvisí s intenzitou onemocnění. Analýza PCR se také provádí v případě terapie interferonem, aby se předepsal trvání a složitost průběhu léčby.

Vlastnosti vysoce kvalitní analýzy PCR pro hepatitidu C

Kvalitativní analýza s indexem polymerázové řetězové reakce je přidělena všem pacientům, kteří mají v krvi protilátky proti hepatitidě C. Pacienti, kteří byli nemocní a získali zpět, musí znovu provést test. Doporučuje se projít testem na hepatitidu B, pak v případě pozitivního závěru a pro hepatitidu D. Také kvalitativně analyzovaná reakce by měla být provedena ve spojení s jinými krevními testy. Analýzy budou ukazovat úplný obraz šíření viru.

Z výsledků testů bude pozitivní nebo negativní pouze pozitivní test na hepatitidu C, tj. Přítomnost nebo nepřítomnost viru. Pokud je výstup "zjištěn", virus je a je stále aktivní. Označení "nezjištěno" označuje nepřítomnost viru nebo jeho malé množství. S tímto indikátorem je třeba mít na paměti, že analytická citlivost diagnostických systémů je odlišná a že RNA hepatitida C může být stále v krvi, ale v analýze se nezjistila.

Obzvláště citlivá metoda PCR ultra hepatitida C se odhaluje i ve slabých množstvích. Používá se fluorescenční hybridizační studie, která je mnohonásobně vyšší než standardní PCR systémy. Metoda se používá v několika případech:

  • podezření na skryté formy hepatitidy C;
  • Diagnostika PCR nepotvrdila patogen, ale existují protilátky;
  • v případě využití;
  • detekovat časnou infekci.
Zpět do obsahu

Analýza dekódování

PCR dekódování HCV ovlivňuje konečné rozhodnutí při diagnostice, zejména ultrametodovou metodou. Hlavní nevýhodou této studie je přísné dodržování sterilních podmínek pro vzorek a materiály. Mírná odchylka někdy ukazuje nepřesné analytické závěry, komplikuje diagnózu a následnou léčbu. Analýza PCR pro stanovení RNA hepatitidy ne vždy s jistotou ukazuje obraz choroby, někdy jsou nepřesnosti povoleny a v obou směrech.

Při diagnostice viru hepatitidy se doporučuje provést komplexní vyšetření.

Norma indikátorů

Absence protilátek JgM proti virové hepatitidě C ve výsledcích studie je považována za normu při analýze polymerázové řetězové reakce. Současně zjištění sérologické analýzy naznačují přítomnost protilátek proti viru C a to je také v normálním rozmezí. Kvalitativní definice neukazuje intenzitu onemocnění, pouze odhaluje příčinný účinek hepatitidy C v RNA. Tato analýza se po ošetření opakuje, aby se potvrdilo skutečné uzdravení.

Odchylky

Pokud jsou přítomny protilátky JgM proti HCV RNA, znamená to rozvoj infekce. Onemocnění současně postupuje akutně nebo chronicky, projevující se v různých stádiích. Pokud dojde k poklesu počtu protilátek, analýza naznačuje, že výsledky léčby byly dosaženy během regenerace. Pouze extrémně vzácné případy falešných pozitivních účinků se objevují v diagnóze. Objevují se u žen během těhotenství a u lidí s jinými infekčními nemocemi.

Náklady na testování krve a PCR pro hepatitidu C

Hepatitida C je zánětlivá patologie, při níž jsou postiženy jaterní buňky. Onemocnění se vyvíjí v důsledku proniknutí viru hepatitidy C (HVC) do lidského těla.

Forma onemocnění může být akutní nebo chronická.

Nejčastěji se příznaky akutní formy nemoci, většina pacientů nejsou k dispozici, někdy nemoc je doprovázena bolestí v břiše, snížená výkonnost, zvýšená únava, nechutenství porucha, tmavý odstín moči, zabarvení stolice, žloutnutí kůže a sliznic, bolesti kloubů. Tyto příznaky se obvykle vyskytují 6-8 týdnů po infekci, ale mohou se objevit po šesti měsících.

Při vývoji těchto jevů je nutné kontaktovat zdravotnickou instituci a podrobit se komplexnímu vyšetření celého organismu. V rámci lékařské prohlídky se provádí krevní test na hepatitidu C.

Dnes s pomocí moderních diagnostických technik lze tuto patologii identifikovat v počátečním stádiu vývoje, což značně zvyšuje šance na úplné vyléčení této nemoci.

Následující skupiny lidí jsou vyzváni k testování hepatitidy C:

  • ženy v době nosení dítěte;
  • osoby se známkami hepatitidy;
  • zdravotnický personál;
  • potenciální orgány a donory krve;
  • drogově závislých, HIV infikovaných osob, promiskuitního intimního života.

Seznam požadovaných studií

Jaké testy mám vzít pro hepatitidu C? Pro přesné diagnostiku onemocnění, identifikaci jeho příčin a určení stavu jaterního parenchymu jsou požadovány následující studie:

  • obecné vyšetření moči a krve;
  • biochemická analýza krve;
  • PCR analýza;
  • krevní test na detekci protilátek proti HVC;
  • krevní test na existující protilátky proti vlastním jaterním buňkám;
  • jaterní biopsie.

Dekodace krevních testů pro hepatitidu C provádí odborník. Zvažte podrobněji všechny metody výzkumu a pochopíme, která analýza hepatitidy C je nejpřesnější.

Obecná analýza

Při provedení obecné krevní testy na hepatitidu C můžete hodnotit stav pacienta. Změny v parametrech krve nejsou vnímány jako specifické příznaky hepatitidy, avšak s touto nemocí existují takové poruchy jako:

  • snížená koncentrace hemoglobinu, destiček a leukocytů;
  • zvyšuje obsah lymfocytů;
  • srážení krve je porušeno;
  • míra sedimentace erytrocytů (ESR) se zvyšuje.

Obecná analýza moči umožňuje detekovat ve svém složení urobelin - pigment žluči, který se vyskytuje v moči jako důsledek narušení funkce jater.

Biochemická analýza

Biochemická analýza krve u hepatitidy C umožňuje identifikovat takové poruchy jako:

  • zvýšené hladiny jaterních enzymů (alanin-transamináza - ALT a aspartátaminotransferáza - AST), které vstupují do krve po poškození hepatocytů. V normálním stavu by tyto ukazatele u mužů neměly být vyšší než 37 IU / l u žen - ne vyšší než 31 IU / l. Zvýšená koncentrace ALT a AST u asymptomatické hepatitidy C je často jediným příznakem této nemoci. Kromě toho se zvyšuje hladina glutamyl-transpeptidázy alkalické fosfatázy (obvykle není vyšší než 150 IU / l).
  • je překročen obsah bilirubinu (jak obecný, tak přímý) v krvi. Pokud hladina žlutého pigmentu v séru překročí 27-34 μmol / l, dochází k žloutence (až 80 μmol / l v mírné formě, 86-169 μmol / l - u středně závažných, nad 170 μmol / l - v těžké formě).
  • Úroveň albuminu je snížena, koncentrace gamaglobulinů se naopak zvyšuje. Gamma globuliny jsou tvořeny imunoglobuliny - protilátky, které chrání organismus před choroboplodnými látkami.
  • zvýšená koncentrace triglyceridů v krvi.

PCR test

Pomocí metody PCR je možné diagnostikovat příčinu choroby. Provedení této analýzy umožňuje detekovat virus v krvi, i když jeho množství je minimální. Analýza PCR pro hepatitidu C umožňuje zjistit stávající infekci v krvi již po 5 dnech od okamžiku infekce, tj. Dlouho před objevením protilátek.

Pokud je výsledek krevní testu na hepatitidu C pomocí PCR pozitivní, znamená to přítomnost aktivní infekce v těle. Pomocí této metody můžete provádět kvalitativní a kvantitativní studium HVC RNA.

Během kvalitativní analýzy PCR pro hepatitidu C je možné detekovat existující virus v lidském těle.

Tento diagnostický postup se provádí, pokud je v krvi zjištěna anti-HVC.

Dešifrování analýzy hepatitidy C obsahuje informace, že infekce byla v těle detekována nebo nebyla detekována. Obvykle se v krvi nenacházejí žádné patologické látky.

Pokud je test na hepatitidu C pozitivní, znamená to, že patogen se neustále dělí a infikuje jaterní buňky.

Výsledky této analýzy mohou být nespolehlivé, je možné v následujících případech:

  • použitý kontaminovaný biomateriál;
  • v přítomnosti heparinu v krvi;
  • v přítomnosti chemických nebo bílkovinných látek (inhibitorů) ve studovaném biomateriálu, které ovlivňují prvky PCR.

Kvantitativní analýza hepatitidy C poskytuje informace o množství viru obsaženého v krvi, tj. Určuje virovou zátěž. Tímto pojmem se rozumí objem HVC RNA přítomného v krvi (například v 1 ml). Při interpretaci kvantitativní analýzy hepatitidy C je tato hodnota vyjádřena v digitálním ekvivalentu měřeným v IU / ml.

Krev pro PCR pro hepatitidu C se užívá před terapeutickými opatřeními. Po analýze je provedena v 1, 4, 12 a 24 týdnech. Studie ve 12. týdnu je orientační a je prováděna s cílem posoudit účinnost lékařských postupů.

Pokud je test na hepatitidu C během těhotenství pozitivní a hodnoty virového zatížení jsou překročeny, riziko přenosu patogenů z nemocné matky na dítě se zvyšuje několikrát. Také při zvýšených hodnotách virové zátěže je provádění terapeutických opatření obtížné.

Podle přepisu testů na hepatitidu C, jestliže hodnoty virového zatížení překračují 800 000 IU / ml, pak je vysoká. Pokud jsou hodnoty nižší než 400 000 IU / ml, je úroveň virové zátěže považována za nízkou.

Analýza hepatitidy C pomocí PCR je považována za nejpřesnější a má několik výhod oproti jiným možnostem výzkumu, a to:

  • přímou diagnózu příčinného původu onemocnění. Při provádění tradičních studií se určuje přítomností proteinových markerů, které jsou odpadními produkty patogenů. To pouze naznačuje, že infekce je přítomna v krvi. Při testování na hepatitidu C pomocí PCR je možné určit typ patogenu nebezpečné patologie.
  • specificita techniky. Během tohoto postupu se v biomateriálu určuje jedinečná oblast DNA, která odpovídá pouze jednomu typu patogenu. To minimalizuje pravděpodobnost nepravdivých výsledků.
  • vysoká citlivost. Při analýze PCR můžete zjistit minimální množství viru. To je důležité, pokud jsou identifikovány podmíněně patogenní látky, které představují hrozbu pouze v případě, že se jejich hladina zvyšuje.
  • Při použití této techniky v jednom vzorku biomateriálu lze najednou detekovat několik patogenů.
  • mohou detekovat skryté infekce. Navíc analýza umožňuje diagnostikovat patogenní mikroorganismy, které žijí uvnitř buněk a mají vysokou antigenní variabilitu.

Pokud jsou výsledky testů pozitivní, pak se v biomateriálu nacházejí stopy viru, pak má síť v těle infekci.

Negativní analýza PCR pro hepatitidu C znamená, že v biomateriálu nejsou stopy infekce.

Imunologická studie

Tato metoda vám umožňuje identifikovat protilátky proti všem typům viru hepatitidy, stejně jako protilátky proti jaterním buňkám vašeho těla, jejichž vzhled přispívá k rozvoji autoimunitní hepatitidy.

Výsledky získané během studie jsou relevantní po dobu 3 měsíců, pak byste měli znovu podat krev na hepatitidu C.

Je také možné provést expresní studii pomocí speciálních testovacích proužků. Tato analýza umožňuje stanovit protilátky proti viru C v složení krve a slin. Tento postup lze provést nezávisle doma.

Biopsie jater

Pro provedení takové analýzy se provede jaterní parenchyma a provede se histologické vyšetření získaného biomateriálu. To vám umožní posoudit stav těla: identifikovat zánětlivé, nekrotické ložiska, stadium fibrózy a tak dále.

Dnes se používají testy, které nahrazují histologickou analýzu jaterního parenchymu.

K posouzení stupně poškození jater a intenzity zánětlivého procesu se používají specifické biomarkery žilní krve. Pomocí nástroje FibroTest můžete posoudit stupeň růstu vláknité tkáně.

Při provádění testu Actitest získáte informace o intenzitě patologických procesů v jaterním parenchymu. Pomocí Steatototesta můžete diagnostikovat tukové tkáně jater a posoudit rozsah tohoto procesu. Fibromax se skládá ze všech výše uvedených testů a může zahrnovat některé další studie.

Příprava na studium

Jaké testy se provádějí pro hepatitidu C a jak jsme zjistili tento nebo druh výzkumu. Je stejně důležité vědět, jak se připravit na analýzu.

Chcete-li získat spolehlivé výsledky, doporučujeme dodržovat následující požadavky:

  • Testy na hepatitidu C se musí provést ráno, na prázdný žaludek. V poslední době by měly být potraviny spotřebovány alespoň 8 hodin před zahájením studie.
  • Biomateriál lze shromažďovat ve dne nebo večer. V takovém případě je důležité, aby mezi posledním jídlem a analýzou prošlo alespoň 5-6 hodin.
  • před odběrem krve pro hepatitidu C, čaj, káva, džus nebo jiné nápoje by měly být vyřazeny, pouze voda je povolena.
  • 48 hodin před zahájením studie je nutné vyloučit použití tučných, smažených potravin a nápojů obsahujících alkohol.
  • alespoň hodinu před analýzou se musíte zdržet kouření.
  • analýza by se neměla provádět bezprostředně po ultrazvuku, instrumentálním vyšetřením, rentgenovým vyšetřením, masáží nebo fyzioterapií.
  • jeden den před provedením studie je nutné vyloučit užívání léků a intenzivní fyzickou aktivitu. Emocionální stres je také kontraindikován.
  • Doporučuje se strávit 15 minut před provedením studie v klidném stavu.

Provádění procedury sběru krve

Kde se dostaneme k testování na hepatitidu C? Odběr vzorků biomateriálu pro další výzkum se provádí v laboratoři lékařské instituce nebo v domově pacienta.

Krev z žíly se užívá následovně:

  • s pomocí speciálního turnaju zabaleného kolem předloktí pacienta se zastaví žilní průtok krve. Díky takovým manipulacím budou žíly naplněny krví a budou viditelné, což výrazně usnadní proces vkládání jehly.
  • oblast kůže, ve které je jehla vložena, je pečlivě ošetřena alkoholem nebo kapalinou obsahující alkohol.
  • Jehla je jemně vložena do žíly a potom je k ní připojena zkumavka, která je speciálně navržena pro sběr krve.
  • Bezprostředně po vložení jehly do žíly se stlačovací svazek vyjme z paže pacienta.
  • po odebrání objemu krve potřebného pro analýzu je jehla jemně odstraněna z žíly.
  • sterilní bavlněný tampón nebo gázová vložka navlhčená alkoholem musí být aplikována na místo vpichu.
  • aby se zabránilo výskytu hematomu, měl by se tampon stlačit s určitou námahou proti oblasti pro vložení jehly, ohýbat rameno v kolenním kloubu a držet ho v této poloze po dobu několika minut. Takové akce také pomohou zastavit krev rychleji.

Za předpokladu, že technika vnitřní administrace je dobrá, je tento postup absolutně bezpečný a nezpůsobuje bolestivé pocity.

Ve vzácných případech může po odběru krve dojít k zduření žil. Tento jev se nazývá "flebitida". Komprese (ne horké) pomůže vyřešit problém, měla by být aplikována na zduřené oblasti pokožky několikrát denně.

Některé problémy mohou nastat i v případě poruchy krvácení. Užívání aspirinu, warfarinu a jiných ředidel krve může způsobit krvácení. Proto před provedením analýzy je nutné odmítnout užívání jakéhokoliv léku. Pokud léčbu nelze zrušit, měli byste informovat odborníka.

Termíny a ceny

Kolik se testuje na hepatitidu C? Výsledky krevního testu na hepatitidu mohou být připraveny během několika hodin a během několika dní (zpravidla ne více než 8 dní). Doba trvání přípravy výsledků závisí na typu viru a zvolené metodě analýzy. Rychlejší je studie provedená metodou PCR. Výsledky v tomto případě budou připraveny během několika hodin.

Kolik stojí test testu hepatitidy C? V závislosti na klinice a složitosti studie se cena procedury může pohybovat od 400 do 11000 rublů.

Měli byste si být vědomi toho, že může trvat několik týdnů k vytvoření dostatečného množství protilátek proti HVC. Proto v počáteční fázi vývoje patologie může být výsledek studie falešně negativní.

Kromě toho je možné získat nespolehlivé údaje s nízkou kvalitou analýzy a porušením podmínek přepravy získaného biomateriálu (vzorky musí být dodány do laboratoře maximálně 2 hodiny po odběru vzorků krve).

Pokud je výsledek studie pozitivní, měli byste okamžitě kontaktovat lékaře s infekčními nemocemi. Specialista provede další vyšetření a předepíše vhodnou léčbu.

Provádění analýzy PCR pro hepatitidu C a dekódování výsledků

Analýza PCR proti hepatitidě C je studie, jejímž hlavním účelem je identifikovat genetický materiál původního původu. Analýza odhaluje příčinný účinek onemocnění pomocí polymerázové řetězové reakce. Tato diagnóza má vysoký stupeň přesnosti, specificitu pro zjištění nepřítomnosti nebo přítomnosti virové infekce.

Podstata diagnózy

Za účelem provedení analýzy PCR pro stanovení viru hepatitidy C od pacienta se odebírá žilní krve, která potenciálně obsahuje HCV požadovanou virem RNA (ribonukleové kyseliny).

Test PCR na hepatitidu C předpokládá postup, kdy se k pacientovým krevním částicím přidá následující:

  • primerů (krátké uměle syntetizované oblasti nezbytného genu);
  • speciální enzym (RNA polymeráza).

Po shromáždění biologického materiálu je poslán pro výzkum v laboratoři. Jedna část krve je potřebná pro přímou analýzu PCR, druhá je odeslána do studie metodou ELISA. Enzym je schopen v krátkém čase zvýšit počet genetického materiálu viru patogenu. Ve zvláštním zařízení se provádí několik cyklů tepelných a chladicích procesů. V závěrečné fázi je získaný materiál porovnán s geny viru a je učiněn závěr o přítomnosti nebo nepřítomnosti patologie v těle pacienta.

Podstata a provádění analýzy PCR v laboratoři. Natočeno SiberianMedicalLaboratory.

Druhy výzkumu

Existují 3 typy diagnostiky, které umožňují určit přítomnost viru hepatitidy C v lidském těle:

  • genotypizace;
  • kvalita;
  • kvantitativní.

Kvalitativní metoda

Diagnóza hepatitidy C s kvalitní metodou je použitelná u pacientů, u nichž jsou v krevní zkoušce detekovány protilátky proti viru. V případě přítomnosti akutní fáze HCV RNA taková diagnostická opatření umožňují určit přítomnost onemocnění během 1-2 týdnů po infekci. Během tohoto období nemusí být protilátky proti hepatitidě C ještě vyvinuty.

Kvantitativní metoda

Pro stanovení koncentrace viru v krevních vzorcích se používá kvantitativní diagnostická metoda. Takový test viremie (stupeň koncentrace) umožňuje přesně stanovit počet jednotek virové RNA. Konečný výsledek je vyjádřen v odpovídajícím objemu. Pokud mluvíme o kvantitativní analýze, ukazatele jsou měřeny v 1 ml (1 kub. Cm).

Parametr virové zátěže znamená úroveň infekčnosti onemocnění, tj. Odráží míru "infekčnosti" pacienta. V praxi to znamená, že čím vyšší je koncentrace viru v krvi, tím větší je pravděpodobnost, že pacient infikuje ostatní s hepatitidou C. Kvantitativní metoda výzkumu také umožňuje stanovit kvalitu a účinnost provedené léčby.

Genotypizace

Genotypizace odhaluje mutace vyvolávajícího onemocnění. Před stanovením léčebného plánu je určen genotyp viru: na něm závisí kvalita a trvání léčby. Například při léčbě onemocnění typu I je účinnost 60%, u typu II, III - asi 80%.

Výhody analýzy PCR pro hepatitidu

Mezi hlavní výhody postupu patří:

  1. Možnost včasné diagnostiky. PCR analýza je schopna detekovat přítomnost viru v raných stádiích infekce.
  2. Nízké výsledky chyb. Studovaný biologický zdroj umožňuje diagnostikovat část genetického materiálu, která je charakteristická pouze pro jeden typ virové infekce. Tato okolnost umožňuje zabránit falešným diagnostickým výsledkům.
  3. Vysoký stupeň citlivosti. PCR analýza je schopna detekovat RNA virus v malých množstvích, což také umožňuje sledovat latentní infekce v čase.

Indikace pro

Testování PCR pro hepatitidu C je nezbytné, je-li k dispozici:

  • mít kontakt s nemocnými, což by mohlo vést k infekci;
  • příznaky jaterní cirhózy (zvětšení sleziny, neobvyklé změny velikosti jater, detekce žilního plexu na břiše pod kůží);
  • pozitivní výsledky testu ELISA;
  • zvýšená aktivita AST a ALT (projevující se biochemickou analýzou krve);
  • nutnost kontrolovat provádění antivirové terapie;
  • počáteční fáze léčby pro potřebu stanovení virové zátěže;
  • provedení závěrečné fáze léčby k odstranění možných recidiv;
  • přítomnost hepatitidy B u pacienta za účelem vyloučení vývoje smíšeného poškození jater.

Jak se připravit na darování krve pro studie PCR

Příprava analýzy PCR zahrnuje následující doporučení:

  • krev se užívá ráno;
  • analýza se provádí na prázdném žaludku, proto doporučujeme provést přestávku mezi posledním jídlem 8-10 hodin;
  • několik dní před diagnózou by měla být vyloučena mastná, pikantní a smažená jídla, alkoholické nápoje a kouření;
  • jeden den před analýzou by se mělo zdržet těžké fyzické námahy, vyloučit třídy v posilovně nebo plaveckém bazénu.

Výsledky analýzy: normy a odchylky

Samotná analýza není dlouhá a vysoce kvalifikovaný specialista na hepatologii nebo specialisty na infekční onemocnění dešifruje výsledky PCR pro hepatitidu C. Na základě výsledků analýzy je pacient diagnostikován.

Za účelem správného rozčlenění výsledků průzkumu jsou zohledněny následující ukazatele:

  • biochemická analýza krve;
  • ultrazvukové údaje;
  • výsledky biopsie.

Interpretace kvantitativní analýzy

Při získávání výsledků kvantitativní analýzy PCR se berou v úvahu následující ukazatele:

Základní testy na hepatitidu C

Virové hepatitidy C jsou závažným zdravotním a společenským problémem. Na tomto světě trpí asi 180 milionů lidí na světě, každý rok zemře 350 tisíc lidí. Dlouhodobý latentní (asymptomatický) průběh hepatitidy C vede k pozdní diagnostice. Analýza hepatitidy C se provádí za účelem diagnostiky onemocnění, diferenciální diagnózy, s pomocí jejího určení předem přenášené nemoci "stojí". Studie se používá u pacientů s příznaky hepatitidy C, zvýšených hladin jaterních enzymů, při získávání informací o dříve přenášené hepatitidě s neurčenou etiologií, u rizikových lidí a studií screeningu.

Diagnostika hepatitidy C se provádí ve dvou fázích:

Stupeň 1 Stanovení přítomnosti protilátek proti viru hepatitidy C (anti-HCV) v séru.

Stupeň 2 V přítomnosti anti-HCV se provede test na přítomnost RNA (ribonukleové kyseliny) pomocí PCR pro hepatitidu C. Test umožňuje identifikovat fázi procesu - "aktivní / neaktivní", abychom vyřešili otázku potřeby léčby. Je známo, že přibližně 30% osob infikovaných virem hepatitidy C se samo od sebe zbavuje infekce, protože mají silný imunitní systém a nepotřebují léčbu. Použití PCR je určeno genotypem viru. Různé genotypy reagují odlišně na léčbu.

Stupeň poškození jater u hepatitidy C se stanoví pomocí biopsie nebo jiných invazivních a neinvazivních testů (například fibrotest). Stupeň steatózy jater určuje steatotesta. Ve všech případech by měla být diagnostika hepatitidy C založena na údaji z epidemiologického vyšetření, na klinice onemocnění a na základě údajů z biochemických krevních testů.

Obr. 1. Závažné účinky virové hepatitidy C - intenzivní ascites.

Test hepatitidy C: anti-HCV

Anti-HCV protilátky (anti-HCV) jsou specifické markery infekce. V těle nemocné osoby se produkují specifické protilátky na proteiny viru hepatitidy C (antigeny) - imunoglobuliny třídy IgM a IgG (anti-HCV IgM / IgG).

Po přijetí pozitivního výsledku pro protilátky proti viru hepatitidy C se provádí potvrzující test - stanovení celkových protilátek proti strukturálním a nestrukturálním proteinům viru. Konstrukční obalové proteiny virem E1 a E2 jsou produkovány anti-HCV IgM, nukleokapsidovým proteinem C-cor (anti-HCV IgG) a 7 nestrukturními proteiny - enzymy NS-anti HCV NS IgG.

Pro detekci protilátek proti viru hepatitidy C se používá enzymatický imunosorbentní test (ELISA). Potvrzující testy - RIBA (rekombinantní imunoblotování), méně často Inno-Lia (analýza syntetických peptidů) se používají k potvrzení výsledků (+) ELISA.

Anti HCV IgM

  • HCV IgM protilátky se objevují v séru 4-6 týdnů po infekci a rychle dosahují maxima. Na konci akutního procesu (po 5 - 6 měsících) se jejich koncentrace snižuje.
  • Dlouhodobý záznam přítomnosti anti-HCV IgM naznačuje, že hepatitida C získala chronický průběh.
  • Zvýšení hladiny IgM v období chronické hepatitidy C naznačuje reaktivaci infekčního procesu.
  • Úroveň IgM imunoglobulinů umožňuje zhodnotit účinnost léčby.

Anti HCV IgG

HCV IgG protilátky se objevují v séru pacienta 11 až 12 týdnů po infekci. Po 5-6 měsících se zaznamenává vrcholová koncentrace. Další protilátky

zůstávají na konstantní úrovni po celou dobu trvání onemocnění v akutním období a během období obnovy.

Celkové protilátky proti viru hepatitidy C

Celkové protilátky proti viru hepatitidy C (celkové anti HCV) se používají k diagnostice "čerstvých" případů onemocnění. Celkové protilátky jsou protilátky proti nukleokapsidovému proteinu C - cor (anti HCV IgG) a 7 nonstructural NS proteinovým enzymům (anti HCV NS IgG) anti HCV NS3, anti HCV NS4 a anti HCV NS5.

Celkové protilátky proti viru hepatitidy C se objevují v séru infikované osoby po 11 až 12 týdnech od začátku infekce, dosahují vrcholu o 5 až 6 měsíců a zůstávají na konstantní úrovni během celého období onemocnění v akutním období a během 5 až 9 let po období zotavení.

Každý typ protilátek má nezávislou diagnostickou hodnotu:

  • AntiHCVC (cor) jsou hlavní indikátory kontaktu s hepatitidou C.
  • AntiHCVNS3 detegoval jeden z prvních v procesu sérokonverze (tvorba protilátek v reakci na přítomnost viru), indikoval závažnost infekčního procesu a naznačoval vysokou virovou zátěž. S jejich pomocí se dědičná hepatitida C určí u pacientů, u nichž není podezření, že mají infekci. Dlouhodobá přítomnost anti-HCV NS3 v séru naznačuje vysoké riziko chronicity procesu.
  • AntiHCVNS4 naznačuje, že infekční proces má dlouhou cestu. Úroveň titrů protilátek lze posoudit podle stupně poškození jater.
  • AntiHCVNS5 indikuje přítomnost virové RNA. Jejich objev v akutním období je předchůdcem chronicity procesu. Vysoké titry protilátek na pozadí léčby naznačují, že pacient nereaguje na léčbu.
  • AntiHCVNS4 a antiHCVNS5. Tento typ protilátek se objevuje v pozdních stádiích vývoje hepatitidy. Jejich snížení naznačuje vznik remise infekčního procesu. Po léčbě jsou titry anti-HCV NS4 a anti-HCV NS5 redukovány během 8 až 10 let. Tento typ protilátky nechrání proti reinfekci.

Obr. 2. Makrostruktura jater. Cirhóza jater u hepatitidy C.

Dekódovací analýza pro hepatitidu C

Absence protilátek proti viru hepatitidy C je indikována výrazem "norma". To však neznamená vždy nepřítomnost onemocnění u lidí. Takže nepřítomnost protilátek v krvi infikované osoby se zaznamená, dokud se neobjeví v krvi - až 6 měsíců od okamžiku infekce (v průměru 12 týdnů). Doba nepřítomnosti protilátek v krvi infikované osoby se nazývá "sérologické okno". Testovací systémy třetí generace (ELISA-3) mají vysokou specificitu (až 99,7%). Asi 0,3% představovalo falešně pozitivní výsledky.

Přítomnost anti-HCV indikuje současnou infekci nebo infekci v minulosti.

  • Detekce IgM protilátek a anti-HCV Cor Cor IgG, zvýšení titrů anti HCV IgG a (+) PCR výsledky za přítomnosti klinických a laboratorních příznaků akutní hepatitidy naznačují akutní období onemocnění.
  • Detekce anti-IgM, anti-HCV IgG IgG, anti-HCV NS IgG a (+) PCR vede k přítomnosti klinických a laboratorních příznaků hepatitidy, což naznačuje reaktivitu chronické hepatitidy C.
  • Detekce anti-HCV IgG IgG proti HCV a anti-HCV NS IgG v nepřítomnosti klinických a laboratorních příznaků hepatitidy a výsledek negativní PCR naznačuje, že pacient má v latentní fázi chronickou hepatitidu.

Obr. 3. Macrodrug jater. Primární rakovina jater. Jedním z důvodů pro rozvoj onkologie je cirhóza jater, která vznikla na pozadí chronické hepatitidy C.

PCR analýza pro hepatitidu C

Polymerázová řetězová reakce (PCR) je "zlatým standardem" pro diagnózu virové hepatitidy C. Vysoká citlivost testu umožňuje detekovat genetický materiál virů (RNA), i když v studovaném materiálu je jen málo z nich. PCR je schopen detekovat RNA viry dlouho před vznikem protilátek v séru, ale ne dříve než od 5. dne od okamžiku infekce. Když je choroba detekována pomocí PCR, RNA viry jsou detekovány nejen v séru, ale také v jaterních biopatech.

  • Polymerázová řetězová reakce umožňuje určit přítomnost nebo nepřítomnost virů hepatitidy C v krvi a rozhodnout o zahájení léčby. Je známo, že až 30% pacientů se samo o sobě zbaví infekce, neboť mají silný imunitní systém a nepotřebují léčbu.
  • Pro sledování účinnosti léčby se používá hepatitida C PCR.
  • PCR se používá v nepřítomnosti protilátek v krvi, avšak za přítomnosti silných podezření na hepatitidu C (zvýšené hladiny alkalické fosfatázy, celkového bilirubinu, dvojnásobný přebytek jaterních enzymů AST a ALT).
  • PCR analýza pro hepatitidu C se používá k řízení intrauterinního přenosu virů hepatitidy.

Virová zátěž hepatitidy C

Pomocí analýzy PCR je možné stanovit nejen přítomnost virové RNA v krvi - kvalitativní analýzu (detekovanou / nezjištěnou), ale jejich počet - virovou zátěž (počet jednotek virové RNA v 1 ml krve). Pro monitorování účinnosti léčby hepatitidy C se používá kvantitativní indikátor PCR.

Metody používané pro PCR mají odlišnou citlivost. V Ruské federaci se v souladu s metodickými doporučeními z roku 2014 doporučuje použít metody, které mají citlivost 25 IU / ml nebo méně. Podle doporučení Evropské asociace pro studium jater z roku 2015 se navrhuje použít metody pro stanovení virové RNA s citlivostí 15 IU / ml nebo méně.

V závislosti na citlivosti testovacího systému pacient obdrží jeden nebo jiný výsledek studie:

  • Minimální citlivost analyzátoru COBAS AMPLICOR je 600 IU / ml (analyzátor staré generace).
  • Minimální citlivost analyzátoru HCB-TEST COBAS AMPLICOR je 50 IU / ml, což je 100 kopií na ml.
  • Minimální citlivost analyzátoru HCV RealBest RNA je 15 IU / ml, což je 38 kopií na ml (zařazených do skupiny moderních testovacích systémů). Specificita těchto analyzátorů je 100%. S jejich pomocí jsou detekovány RNA viru hepatitidy C podtypů 1a a 1b, 2a, 2b, 2c a 2i, 3, 4, 5a a 6.

Pokud jsou kopie RNA pod hranicí citlivosti tohoto analyzátoru, pacient obdrží odpověď "nezjištěna".

Obr. 4. Příklad analýzy PCR (kvantitativní test). Virová zátěž je stanovena pro hepatitidu C.

Interpretace výsledků analýzy PCR pro hepatitidu C

  • Absence viru RNA indikuje nepřítomnost infekce.
  • Absence RNA proti přítomnosti protilátek v krvi naznačuje zmizení viru hepatitidy C pod vlivem léčby nebo se samoléčbou.
  • V některých případech je virus přítomen v krvi, ale na podsvětí, když jeho koncentrace není zachycena analyzátory. Tito pacienti zůstávají nebezpeční z hlediska infekce.
  • Detekce RNA viru po dobu 6 po sobě jdoucích měsíců u pacientů s akutní hepatitidou C naznačuje, že onemocnění trvá chronickým průběhem.
  • Snížení virové RNA během léčby naznačuje účinnost terapie a naopak.

Obr. 5. Mastná hepatóza. Jednou z příčin poškození jater je virový hepatitida C.

Základní biochemické krevní testy pro hepatitidu C

Biochemické krevní testy pomáhají stanovit funkční stav mnoha lidských orgánů a systémů.

Jaterní enzymy ALT a AST

Jaterní enzymy se syntetizují intracelulárně. Jsou zapojeni do syntézy aminokyselin. Většina z nich se nachází v buňkách jater, srdce, ledvin a kosterních svalů. Při porážce orgánů (narušení integrity buněčných membrán) vstupují enzymy do krve, kde se jejich hladina zvyšuje. Zvýšené hladiny enzymů jsou zaznamenány při porážce (lýza, destrukce) jaterních buněk, infarktu myokardu a dalších chorobách. Čím vyšší je hladina transamináz v séru, tím více buněk bylo zničeno. ALT převládá v buňkách jater, AST - v buňkách myokardu. Při destrukci jaterních buněk se hladina ALT zvyšuje 1,5 - 2krát. Při destrukci buněk myokardu se hladina AST zvyšuje o 8 až 10krát.

Při diagnostice chronické virové hepatitidy je třeba věnovat pozornost poměru AST / ALT (koeficient de Ritis). Přebytek AST nad ALT indikuje poškození jaterních buněk.

  • Norma AST pro muže je až 41 jednotek / l, ženy - až 35 jednotek / l, děti starší 12 let - až 45 jednotek / l.
  • Norma ALT pro muže je až 45 jednotek / l, ženy - až 34 jednotek / l, děti od 12 let a starší - až 39 jednotek / l.
  • Normálně (u zdravých lidí) je poměr AST / ALT v rozmezí 0,91 - 1,75.

Bilirubin

Bilirubin je rozkladem hemoglobinu. Bilirubin v krvi se vyskytuje ve formě nepřímých (až 96%) a přímých (4%). Proces rozkladu této látky se vyskytuje hlavně v buňkách jater, kde se vylučuje z těla žlučí. S destrukcí jaterních buněk se zvyšuje hladina bilirubinu v séru. Obvykle je celkový obsah bilirubin menší než 3,4 - 21,0 μmol / l. Při hladině 30-35 μmol / L a vyšším proniká bilirubin do tkání, čímž se kůže a sklera stávají žloutenkou.

Obr. 6. Když hepatitida C v krvi zvyšuje hladinu bilirubinu. Látka proniká do tkání, což je důvod, proč se kůže a sklera stávají žloutenkou.

Diagnostika PCR pro hepatitidu C

Hepatitida C je zánět jaterních buněk, ke kterému dochází v důsledku infekce virem HCV (hepatitida C) v kontaktu s krví infikované osoby. Genetický kód flaviviru HCV nese molekula RNA (ribonukleová kyselina) obsažená ve struktuře viru. Tento život ohrožující jev se vyznačuje tajemstvím v počáteční fázi patologie. Časový interval mezi infekcí a nástupem příznaků (odpověď imunitního systému) může být od jednoho měsíce do šesti měsíců. Obvykle se choroba stává chronickou formou a je obtížné léčit.

Moderní medicína vám umožňuje diagnostikovat patologii s menším poškozením jater. Mezi nejčastější a nejúčinnější diagnostické metody patří PCR analýza. Zvažte v tomto článku, co to je a jaké druhy to existují.

Jaká je studie

PCR analýza pro hepatitidu C je laboratorní vyšetření, které detekuje flavirus, genetický materiál ribonukleové kyseliny (RNA). Určuje počet molekul RNA v krvi, kvalitu biologického materiálu, genetický typ viru HCV.

Metoda PCR pro hepatitidu C umožňuje detekovat minimální množství flaviru před tvorbou protilátek, zpravidla krátce po infekci.

Studie se často označuje jako analýza RNA, protože detekuje částice ribonukleové kyseliny o velikosti 30-60 nm obsažené ve flavavirusu.

Studie se provádí takto: na prázdném žaludku pacient dává krev z žíly, která se pak testuje různými metodami:

  • PCR v reálném čase se provádí uzavřeným automatizovaným způsobem a má nižší limit pro detekci RNA virů 15 IU / ml;
  • COBAS AMPLICOR s citlivostí 50-100 IU / ml.

Čím vyšší je prah citlivosti diagnostické techniky, tím větší je pravděpodobnost detekce nejnižšího obsahu viru v studovaném biologickém materiálu.

Jaké typy analýz se používají

Analýza, která se úspěšně používá několik desetiletí, se nazývá PCR hepatitida a lze ji snadno a rychle detekovat. V medicíně existují dva způsoby reakce, které se zásadně liší od sebe:

  • kvalitativní metoda odhaluje přítomnost konkrétního viru v biologickém materiálu;
  • kvantitativní analýza měří počet genetické látky, která umožňuje určit stádium patologie nebo zhodnotit účinnost terapeutického kurzu;
  • genotypizace určuje typ viru přítomného v těle.

Krevní test obecně pomáhá identifikovat povahu viremie a genetického typu patogenu. Studie se zpravidla provádí 1krát v závislosti na stupni citlivosti diagnostického systému. Je-li to nezbytné, opakované zkoušení se provádí pomocí ultra-citlivého činidla.

Vysoce kvalitní PCR

Co je vysoce kvalitní PCR RNA pro hepatitidu C? Podstata reakce spočívá v přítomnosti sekvence hepatitidy RNA a reakce je možná pouze v přítomnosti virových proteinů podobné etymologie v testu ELISA. Při porovnávání se zjišťuje zátěž a možné poškození jaterní oblasti.

Charakteristickým rysem této metody je schopnost detekovat i přítomnost odděleného genu.

Je třeba poznamenat, že po obdržení výsledků testu PCR a testu ELISA potřebuje pacient vhodnou léčbu bez ohledu na to, jaký byl konečný výsledek enzymového imunoanalýzy. Pozitivní indikuje infekci a PCR negativní indikuje snížený počet virových částic vzhledem k citlivosti.

Existuje několik podmínek, které ovlivňují tvorbu negativní PCR a ELISA:

  • nedostatek vhodných podmínek pro sběr materiálu;
  • výsledná analýza obsahuje kontaminaci;
  • v případě včasné injekce heparinu k pacientovi.

Ze strany pacienta není nutné dodržovat určitá pravidla pro odběr vzorků krve pro analýzu PCR, v tomto případě kvalita této analýzy závisí na lékaři, který provádí tento postup. Schopnost zjistit přítomnost onemocnění (zejména v akutní formě) se objeví během několika týdnů po infekci.

Kvantitativní analýza

Kvantitativní test se doporučuje k detekci virové zátěže bezprostředně před vznikem další léčby a reakce těla. Proces odběru vzorků krve se provádí podobným způsobem, že při vysoce kvalitní metodě PCR a testu ELISA je jedinou podmínkou nepřítomnost možnosti kouření pacienta před zahájením postupu.

Pokud jde o charakteristiky získaných dat v důsledku studie, zvýšené zatížení je charakterizováno indikátory od 800000 IU / ml, nízké - 400000 IU / ml. Přítomnost viru v těle pacienta je indikována PCR pro hepatitidu, což není negativní kvalitativní test.

Tento druh výzkumu umožňuje určit, jak nebezpečný je pacient vůči lidem kolem něj. Například identifikace vysoké úrovně naznačuje zvýšenou infekčnost pacienta. Kromě toho výsledky analýzy pomáhají formulovat další nejefektivnější léčbu a zjistit, jak moc se stávající léčba považuje za účinnou.

Rychlá negativní reakce testů svědčí o úspěchu zvolené techniky a pomalá odpověď naznačuje potřebu úprav a použití různého způsobu léčby.

Průběh postupu analýzy závisí na konkrétním dni onemocnění. První stanovení se provádí v první den po přijetí pacienta do nemocnice, poté se postup opakuje ve 4, 12 a 24 týdnech po podání léků.

Kvantitativní analýza tedy ukazuje, která léčba je nejúčinnější, trvání dostupné terapie a nebezpečí pacienta ve vztahu k jiným lidem.

Genotypizace

Při studiu materiálové analýzy je důležité určit přesnost genotypu viru, který se odehrává. V současné době existuje 11 odrůd viru hepatitidy C, které naopak zahrnují určitý poddruh.

Všechny tyto druhy reagují odlišně na různá léčení a jednotlivé druhy jsou naprosto odolné vůči mnoha lékům.

Genotyp umožňuje stanovit a ukázat stav jater. Není neobvyklé, že by výsledky měly být zaznamenány "nešifrovány", což znamená, že virus v krvi pacienta není tímto testovacím systémem detekován. To může být zjištěno, pokud určitý genotyp neodpovídá této zóně. V takové situaci se analýza opakuje a pro studium materiálu se používá citlivější systém.

Velmi citlivá metoda

Metoda citlivosti na ultrasenzory je nutná v některých případech, kdy diagnózu hepatitidy nelze provést jinými metodami a kdy je analýza stanovena ošetřujícím lékařem:

  • v případě podezření na přítomnost viru hepatitidy C u pacientů s latentním typem onemocnění;
  • přítomnost protilátek proti viru hepatitidy C, která nebyla potvrzena diagnostikou PCR;
  • aby se zjistila kvalita účinnosti zvoleného způsobu léčby a potvrdilo se vyloučení této nemoci.

Citlivost této metody je mnohem vyšší než u běžně používaných, avšak tato metoda nevylučuje získání falešných výsledků, a to jak pozitivních, tak negativních. V takové situaci je důležité kontrolovat kvalitu postupu a možnost kontaminace samotného materiálu.

Vysvětlení analýzy PCR

Dekódování analýzy se provádí na základě prezentovaných materiálů, výsledky laboratorních studií zahrnují určité údaje popsané výše.

Dekódování může zahrnovat pozitivní PCR polymerázovou řetězovou reakci a negativní ELISA v testu, což znamená, že pacient nemá v krvi známky hepatitidy C, ale v minulosti přenesl akutní formu onemocnění. Při diagnostice zpravidla se specialisté ucházejí o použití testovacích indikátorů PCR.

Shrnutí všech uvedených skutečností lze vyvodit závěr, že během analýzy je důležité dodržovat všechna pravidla a doporučení tak, aby získané výsledky byly co nejpřesnější a na základě získaných údajů bylo možné určit účinnost použité terapie a další šanci na úplné uzdravení.

PCR analýza pro hepatitidu C

Pro diagnózu "chronické virové hepatitidy C (CVHS)" je zapotřebí komplexní vyšetření osoby, které zahrnuje klinické, laboratorní a instrumentální studie. Důležitá z hlediska diagnózy pro správnou diagnózu je metoda PCR - polymerázová řetězová reakce.

Co ukazuje tato analýza a proč je potřeba?

Tato laboratorní metoda detekuje RNA viru hepatitidy C v lidské krvi. Spolu s enzymem spojeným imunosorbentním testem (ELISA) pro protilátky proti viru se PCR používá k diagnóze CVHC a genotypu jejího patogenu. Tento výzkum je jednou z nejnovějších metod laboratorní diagnostiky. Jeho spolehlivost na CVHS přesahuje 97%, což je považováno za velmi dobrý ukazatel pro výzkum.

Existují tři krevní PCR testy pro CVHC: kvalitativní, kvantitativní a virovou genotypizaci. První studie (kvalitativní analýza) viru ji detekuje v krvi, a proto se používá pouze pro diagnostiku.

Druhá (kvantitativní) studie určuje stupeň virové zátěže na těle, a proto se používá k monitorování účinnosti léčby.

Třetí PCR (genotypizace) objasňuje diagnózu, která určuje genotyp viru, což je velmi důležité pro správnou antivirovou léčbu.

Podstatou technologie polymerázové řetězové reakce je použití enzymů, které množí genetický materiál patogenu v biomateriálu. V průběhu takové replikace se zkumavka s krví několikrát zahřívá a ochlazuje na teplotu potřebnou k urychlení enzymatické reakce. V důsledku těchto manipulací se množství virového genomu mnohonásobně zvyšuje, což umožňuje jeho detekci i při minimálním množství.

Diagnostika PCR má mnoho výhod oproti jiným laboratorním testům:

  • vysoká citlivost - 97-98%;
  • zaručená analytická specifičnost (odhaluje přesně patogen, který chcete najít, a ne jeho příbuzné napětí);
  • rychlost vedení (trvá to maximálně 2 dny, než se dostaneme k závěru).

Tři typy PCR testů

Vysoce kvalitní analýza PCR je přidělena všem pacientům, u kterých analýza ELISA detekovala protilátky proti viru HVGS. Po provedení vysoce kvalitní PCR lze získat dvě možnosti odpovědi: "RNA je detekována" nebo "RNA není detekována". K detekci minimálního množství viru v krvi jsou potřebné testovací systémy s citlivostí alespoň 50 IU / ml. Pokud je koncentrace viru v krvi pacienta menší, než diagnostika může určit, výsledek studie může být falešně negativní. Aby se zabránilo takové diagnostické chybě, měly by laboratoře provádějící PCR diagnostiku poskytovat vysoce citlivé zkušební systémy. V laboratoři "Invitro" se například používají testy s citlivostí 15 IU / ml. Laboratorní pracovníci jsou povinni poskytnout informace o citlivosti testů pacientům a lékařům na jejich první žádost.

Kvantitativní analýza PCR určuje stupeň viremie, tj. Koncentraci patogenu v krvi, virovou zátěž. Výsledek této studie, na rozdíl od vysoce kvalitní PCR, je vyjádřen v počtu, například 2 × 10 x 6 IU / ml, což znamená 2 miliony mezinárodních jednotek v 1 ml krve. Některé laboratoře používají jiný ukazatel - počet kopií / ml. Tyto dva ukazatele lze snadno převést: 1 mezinárodní jednotka se rovná 4 kopiím RNA. Takže 2 x 10 x 6 IU / ml znamená, že 8 x 10 x 6 kopií virové RNA v 1 ml, tj. 8 milionů kopií v 1 ml krve.

Genotypizace je definice jednoho ze šesti genotypů viru. Klinický obraz, rychlost vývoje komplikací jater a prognóza budoucího života pacienta závisí na genotypu vyvolávajícího činitele. Genotyp viru je velmi důležitý již ve fázi diagnostiky, protože kombinace léků a doba trvání terapeutického kursu, který má být pacientovi přidělena, závisí na jeho správném stanovení.

Nicméně i tento zdánlivě "dokonalý" laboratorní výzkum má své nevýhody:

  • studie replikuje genetický materiál všech patogenů, dokonce i neživých, což může způsobit deformaci výsledku. Proto, aby bylo možné monitorovat účinnost pomocí PCR, provede se reanalýza nejdříve 2 měsíce po předchozím, takže mrtvé viry mohou "opustit" tělo pacienta;
  • část virového genomu, která je stanovena pomocí testovacích systémů, může být teoreticky přítomna v jiných virech nebo mikroorganismech, takže existuje možnost falešně pozitivní odpovědi;
  • viry se rychle mění. Někdy je rychlost a rozsah virové mutace tak vysoká, že testovací systém přestane chytat genom. Výsledkem je falešně negativní výsledek.

Aby tyto nedostatky vyrovnaly, výrobci laboratorních testovacích systémů pro diagnostiku PCR neustále provádějí své testy, včetně křížových reakcí a citlivosti na určitý genotyp viru.

Jak provést PCR test na hepatitidu C?

K tomu, aby závěr vyšetření PCR byl spolehlivý, je nutné přísně dodržovat pravidla pro jeho přípravu:

  • výzkum se provádí na prázdném žaludku (glukóza, tuky, minerály, které vstupují do krve z potravy, mohou ovlivnit rychlost a kvalitu enzymové reakce);
  • mezera mezi posledním jídlem a vzorkem krve pro analýzu by měla být nejméně 8 hodin;
  • v předvečer studie je zakázáno užívat alkohol a konzumovat mastné potraviny, jejichž doba eliminace je prodloužena;
  • den před odjezdem do laboratoře by se nemělo vyhnout silnému fyzickému a emocionálnímu stresu;
  • až do doby odběru vzorků krve nedoporučujeme kouřit.

Aby se zabránilo vzniku falešných závěrů, údajný pacient musí do laboratoře přijít o něco dříve, než bude krvácet. Trvalo 15-20 minut, než se člověk chytil dech, uklidnit se. Adrenalin, který je přítomen v krvi po rychlém procházce, může ovlivnit výsledek vyšetření.

Pokud je pacient zařazen do analýzy, užívá nějaké léky, měl by o tom informovat lékaře. Je možné, že některé z nich budou muset být odmítnuty nějakou dobu (pokud je to možné).

Výsledek analýzy PCR pro hepatitidu C

Dekódování výsledků zahrnutých do laboratoře laboratoře laboratoře, která provedla analýzu. Dekódování je definice odchylky výsledku získaného z normy. Míra indikátorů je stanovena přímo výrobcem zkušebního systému, který je používán laboratoří pro diagnostiku. Proto není překvapující, že v některých laboratořích je virální zátěž stanovena v IU / ml a v jiných v kopiích / ml.

Po přijetí závěru je nutné jej správně interpretovat. Léčba výsledků studie by měla provádět ošetřující lékař pacienta s hepatitidou C. Lékař může po objektivním, instrumentálním a laboratorním vyšetření pacienta získat dostatečné množství údajů pro správnou interpretaci získaných výsledků PCR.

Hodnocení kvalitativní analýzy zpravidla nezpůsobuje potíže ani u pacientů. Výsledkem může být pouze jeden: "zjištěný" nebo "nezjištěn". V tomto případě je druhá z nich normou.

Ukazatele kvantitativní analýzy jsou obtížnější interpretovat. Ukazuje stupeň virové zátěže pacienta. Dokonce ani u hepatologů neexistuje konsensus o tom, jak zacházet s detekovanou viremií. Většina lékařů má tendenci věřit, že by mělo být zváženo vysoké zatížení vyšší než 8 × 10 * 5 IU / ml. Zatížení vyšší než 1 × 10 * 7 IU / ml je považováno za velmi vysoké, zatímco nízké zatížení je nižší než 4 × 10 * 5 IU / ml.

Stupeň virové zátěže naznačuje virulenci (agresivitu) viru: čím větší je jeho hodnota v krvi, tím rychleji se mohou vyvinout komplikace jater. Vysoká koncentrace viru v krvi těhotné ženy zvyšuje pravděpodobnost jeho proniknutí přes hemato-placentární bariéru k plodu. Viremie také ovlivňuje účinnost léčby: s nízkým počtem je účinnost léčby vyšší než u vyšších.

Abychom byli přesvědčeni o správnosti analýzy PCR pro hepatitidu C, je třeba upřednostňovat pouze ty laboratoře, které pracovaly dobře. Cenová politika by v tomto případě neměla hrát primární roli.


Více Články O Játra

Hepatitida

Hodnota ALT a AST u hepatitidy

Úroveň enzymových jaterních látek ALT a AST u hepatitidy je nejdůležitějším ukazatelem, protože nejpřesněji ukazuje, jak jater je ovlivněn a jak je nutné upravit terapii tak, aby člověku maximálně pomohla.
Hepatitida

Jak dlouho je nemocnice po operaci odstranit žlučník

Lékaři rozhodují, kolik dní je nemocnice po laparoskopii žlučníku. Lékaři jednají v souladu se zákonem. Poskytuje standardní dobu postižení po operaci.